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出品公司: | ATCC |
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细胞名称: | ATCC CRL-1550~Ca Ski~人宫颈癌肠转移细胞 |
存储人: | RA Pattillo |
种属来源: | 人 |
组织来源: | 子宫 |
疾病特征: | 宫颈癌肠转移 |
细胞形态: | 上皮细胞样 |
生长特性: | 贴壁生长 |
培养基: | RPMI-1640(GIBCO,货号31800022),90%;FBS,10%。 |
产品目录号: | CRL-1550 |
生长条件: | 气相:空气,95%;二氧化碳,5%; 温度:37 ℃, |
传代方法: | 1:2至1:6,每周2次。 |
冻存条件: | 90% 完全培养基+10% DMSO,液氮储存 |
支原体检测: | 阴性 |
**等级: | 2 |
STR: |
Amelogenin: X
CSF1PO: 10
D13S317: 8,12
D16S539: 11,12
D5S818: 13
D7S820: 8,11
THO1: 7
TPOX: 8
vWA: 17
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同工酶: |
G6PD, B |
备注: |
Nucleotide (GenBank) : U89348 Human papillomavirus type 16 variant, complete sequence. |
联系方法: |
何经理,合肥星肽生物科技有限公司,Tel:0551-63802898 400-8702-898 E-mail:info@qingbio.com 网址:http://m.haomenmc.com QQ:514713116 |
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类;
1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。
2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。
3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
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