ATCC CRL-2594~MC3T3-E1~小鼠颅顶前骨细胞亚克隆14
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产品名称: ATCC CRL-2594~MC3T3-E1~小鼠颅顶前骨细胞亚克隆14
产品型号: CRL-2594
产品展商: ATCC
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ATCC CRL-2594~MC3T3-E1~小鼠颅顶前骨细胞亚克隆14
ATCC CRL-2594~MC3T3-E1~小鼠颅顶前骨细胞亚克隆14
ATCC细胞库 MC3T3-E1
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ATCC CRL-2594~MC3T3-E1~小鼠颅顶前骨细胞亚克隆14基本信息
订货专线：4008-702-898
ATCC
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ATCC CRL-2594~MC3T3-E1~小鼠颅顶前骨细胞亚克隆14
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RT Franceschi
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小鼠
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颅顶骨
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成纤维细胞样
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贴壁生长
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MEMα+培养基(GIBCO,货号11900024)，90%；FBS，10%。
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CRL-2594
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气相：空气，95%；二氧化碳，5%; 温度：37 ℃,
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1：2至1：6，每周2次。
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90% 完全培养基+10% DMSO，液氮储存
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阴性
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1
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该细胞是研究体外成骨细胞分化，特别是细胞外基质信号的良好模型。他们的行为类似于原发性颅骨成骨细胞。
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何经理，合肥星肽生物科技有限公司，Tel：0551-63802898 400-8702-898 E-mail：info@qingbio.com
网址：http://m.haomenmc.com QQ:514713116
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ATCC CRL-2594~MC3T3-E1~小鼠颅顶前骨细胞亚克隆14特点和简介
从克隆的但是表型各异的MC3T3-E1细胞系中分离出一系列亚克隆。 从含抗坏血酸培养基生长的成骨细胞中选择高或低成骨细胞分化、矿化的亚克隆。 MC3T3亚克隆4（ATCC CRL-2593）和MC3T3亚克隆14（ATCC CRL-2594）在抗坏血酸和3到4mM无机磷酸盐中生长表现出高水平的成骨细胞分化。 它们10天后形成一个矿化良好的细胞外基质（ECM）。 MC3T3亚克隆24（ATCC CRL-2595)和MC3T3亚克隆30(ATCC CRL-2596)在抗坏血酸中生长表现出很差的成骨细胞分化。 不形成ECM， 可以作为亚克隆4和14的阴性对照。 矿化的亚克隆选择的表达作为成骨细胞标记的mRNA，及唾液酸糖蛋白(BSP)，骨钙素(OCN)，和甲状旁腺激素/甲状旁腺激素相关蛋白受体的mRNA。 高或者低的分化潜能的亚克隆在培养中生产出相似数量的胶原质，表达可比较的基本水平的mRNA编码Osf2/Cbfa1，一种成骨细胞相关转录因子。 植入免疫缺陷小鼠以后，高分化性的亚克隆形成与骨类似的形成小骨的编织骨，低分化细胞只是产生纤维组织。 这些细胞系是研究体外成骨细胞分化的好模型，尤其是ECM信号。 它们和原代培养颅顶成骨细胞的行为类似。 在本库通过支原体检测。
ATCC CRL-2594~MC3T3-E1~小鼠颅顶前骨细胞亚克隆14接受后处理
1) 收到ATCC CRL-2594(MC3T3-E1)细胞后，请检查是否漏液 ，如果漏液，请拍照片发给我们。
2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态，去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。
3) 弃去T25瓶中的培养基，添加 6ml本公司附带的完全培养基。
4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代，传代培养用6ml本公司附带的完全培养 基。
5) 接到细胞次日，请检查细胞是 否污染，若发现污染或疑似污染，请及时与我们取得联 系。
ATCC CRL-2594~MC3T3-E1~小鼠颅顶前骨细胞亚克隆14培养操作
1）复苏细胞：将含有 1mL ATCC CRL-2594(MC3T3-E1)细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然 后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养 过夜）。**天换液并 检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶 中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落 ，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中 或者瓶中。
3）细胞冻存：待ATCC CRL-2594(MC3T3-E1)细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；
1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞， 根据细胞数量加入血 清和 DMSO，轻轻混匀，DMSO 终浓度为 10%，细胞密度不低于1x106/ml，每支冻 存管冻存 1ml 细胞悬液，注意冻 存管做好标识。
3. 将冻存管置于程序降温盒中，放入-80 度冰箱，2 个小时 以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
ATCC CRL-2594~MC3T3-E1~小鼠颅顶前骨细胞亚克隆14培养注意事项
1. 收到ATCC CRL-2594(MC3T3-E1)细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和我们联系。
2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、 所 需细胞因子等，确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由客户 自行承担。
3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细 胞会有少量从瓶壁脱落，将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴 壁，若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力，如果证实ATCC CRL-2594(MC3T3-E1)细胞活力正常， 请将细胞离心后用新鲜 培养基再次贴壁培养；如果染色结果显示细胞无活力，请拍下照片及时和我们联系，信息确认后我们为 您再免费寄送一次。
4. 静置细胞贴壁后，请将细胞瓶内的培养基倒出，留 6~8mL 维持细胞正常培养，待细胞汇合度 80%左右时正常传代。
5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用，ATCC CRL-2594(MC3T3-E1)细胞传代时可以一定比例和客户自备的培养基混合，使细胞逐渐适应培养条件。
6. 建议客户收到ATCC CRL-2594(MC3T3-E1)细胞后前 3 天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和 ******* 技术部沟通交流。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联系，告知细胞的具体情况，以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。
7.该细胞仅供科研使用。
合肥星肽生物科技有限公司作为美国ATCC专业代理商，专业经营ATCC菌种、ATCC原代细胞、培养基、抗体、生物试剂、耗材等，我公司和ATCC共同努力致力于为客户提供可靠的研究材料以及方便快捷的服务，对购买项目的前期资料提供,中期合同保证,后期货物跟踪到*终售后的确保项目准确到位，都有相关专业人士进行维护,确保您在我公司获得*上等服务！
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