人神经干细胞(Cat.1650)分化于人诱导多能干细胞(hiPSC),hiPSC是用HDF中mRNA重组技术分离得到的。使用PSCNIM培养液(Cat.5931)可使单层HDF-hiPSC可有效地转变为神经上皮细胞,PSCNIM是一种无血清的可有效诱导多能干细胞增殖的培养液。GSK3和TGF-β的协同抑制可在LIF存在时,于7天内将HDF-hiPSC细胞向同质神经干细胞(NSC)分化。
该分化的NSC可由巢蛋白和SOX2特异性抗体进行免疫荧光鉴定。细胞数量是高纯度的:>90%的细胞表达巢蛋白,>80%的细胞表达SOX2活性。在复苏之后,NSC可在HPSC神经诱导培养基中贴壁培养,或在含**干细胞培养基的EGF和bFGF中形成**小球。传代后,细胞会形成玫瑰花状和神经管状结构,在含EGF和bFGF的**干细胞培养基中以高密度接种于Matrigel包被的培养瓶中。在用Matrigel包被的培养基中HiPSC-NSC可单层传代几个月,或接种于超低吸附培养瓶时,可在**干细胞培养基中形成悬浮的神经团块。NSC是多能的,可分化为多种神经和神经胶质亚型。特殊图形开端,如SHH、视黄酸和FGF8,在复苏之后可直接引导细胞分化为不同的神经系。
推荐培养基:神经诱导细胞培养基 (PSCNIM, Cat. #5931)